Old Heidelberg University, Tysklands äldsta universitet, byggdes i början av 1700-talet. Det rymmer nu rektors kontor, Old Assembly Hall och University Museum. Museet visar universitetets historia som började med grundandet 1386 och fram till idag. Utställningar, porträtt och dokument förklarar denna historia i tre olika avsnitt. Det finns en om väljarna i Pfalz, en om Baden-eran och en om 1900-talet. Förutom de permanenta utställningarna öppnas varannan månad en ny specialutställning.
På torget framför byggnaden finns en fontän av ett lejon, som heter Löwenbrunnen. Lejonet var symbolen för Pfalz. På baksidan av det gamla universitetet kan besökare se studentfängelset, som var i bruk fram till 1914 och nu är en av de mest populära attraktionerna i staden. Studenter kunde sättas i fängelset från två dagar till fyra veckor beroende på brott, även om livet där var ganska bekvämt.